Tema W09

Respuesta correcta: D) Cortar el ADN en secuencias de nucleótidos específicas y palindrómicas de manera precisa.

• A) Unir de forma covalente azúcares desoxirribosas de diferentes plásmidos.Incorrecto. La unión covalente de fragmentos de ADN es catalizada por la enzima ligasa.
• B) Duplicar de manera exponencial cadenas de ARN dentro de un termociclador.Incorrecto. La duplicación in vitro es realizada por la polimerasa Taq en la PCR, no por endonucleasas.
• C) Degradar las proteínas de la envoltura celular bacteriana antes de la inserción.Incorrecto. Las membranas o paredes se disuelven mediante detergentes, lisozimas o electroporación.
• D) Cortar el ADN en secuencias de nucleótidos específicas y palindrómicas de manera precisa.Correcto. Las enzimas de restricción cortan el ADN reconociendo secuencias diana de 4 a 8 pares de bases.

Respuesta correcta: A) El calor: el incremento de temperatura a ~95 °C rompe los puentes de hidrógeno sin dañar los enlaces fosfodiéster covalentes.

• A) El calor: el incremento de temperatura a ~95 °C rompe los puentes de hidrógeno sin dañar los enlaces fosfodiéster covalentes.Correcto. La desnaturalización térmica separa las hebras de manera reversible en cada ciclo de la PCR.
• B) La fuerza centrífuga a altas velocidades de rotación mecánica de sobremesa.Incorrecto. La centrifugación separa componentes por densidad o masa molecular pero no desnaturaliza la doble hélice de ADN.
• C) La acción catalítica de enzimas helicasas termoestables sintéticas.Incorrecto. La PCR convencional prescinde de helicasas; la separación se logra mediante calor controlado.
• D) El cambio brusco de pH alcalino por adición de hidróxido de sodio concentrado.Incorrecto. El pH químico dañaría irreversiblemente las enzimas Taq polimerasa necesarias para la elongación.

Respuesta correcta: D) Hacia el polo positivo (ánodo) debido a la carga eléctrica negativa neta de los grupos fosfato del ADN.

• A) Hacia el polo negativo (cátodo) atraído por las cargas positivas de las bases nitrogenadas libres.Incorrecto. El ADN es atraído por el ánodo (+), no por el cátodo (-) debido a que es un polímero de carácter ácido negativo.
• B) Hacia el fondo del gel por sedimentación gravitatoria dependiente de los azúcares pentosas.Incorrecto. La gravedad no tiene relevancia en la separación molecular en geles de matriz estrecha.
• C) Se desplazan de manera lateral en círculos concéntricos inducidos por un campo magnético alterno.Incorrecto. La electroforesis utiliza corriente continua lineal unidireccional para forzar el avance de las muestras.
• D) Hacia el polo positivo (ánodo) debido a la carga eléctrica negativa neta de los grupos fosfato del ADN.Correcto. Los fosfatos le otorgan carga negativa constante al ADN, haciendo que migre hacia el ánodo en un campo eléctrico.

Respuesta correcta: C) Un organismo vivo que posee un gen exógeno de otra especie incorporado de forma estable en su genoma.

• A) Un espécimen sometido a radiación ionizante para eliminar selectivamente genes perjudiciales.Incorrecto. La mutagénesis aleatoria por radiación no constituye transgenia, ya que no introduce genes de otras especies.
• B) Un clon idéntico obtenido por transferencia nuclear de células germinales del mismo individuo.Incorrecto. La clonación copia el genoma preexistente; no involucra recombinación interespecífica de genes.
• C) Un organismo vivo que posee un gen exógeno de otra especie incorporado de forma estable en su genoma.Correcto. El transgén es integrado de manera artificial para conferir una característica fenotípica de interés comercial o medicinal.
• D) Un híbrido resultante de la fecundación tradicional de dos variedades del mismo cultivo.Incorrecto. El mejoramiento clásico por cruce sexual es un proceso natural que opera dentro de barreras biológicas.

Respuesta correcta: A) La existencia de una secuencia de inicio y de terminacion reconocibles por la maquinaria bacteriana.

• A) La existencia de una secuencia de inicio y de terminacion reconocibles por la maquinaria bacteriana.Correcto. Aunque el gen venga de un organismo eucariota, si incluye las señales de inicio y de parada del hospedero bacteriano la transcripcion y la traduccion pueden ocurrir en el.
• B) La ausencia de intrones en el ADN bacteriano, que evita tener que procesar el ARN mensajero.Correcto pero no basta por si solo, porque ademas hacen falta las señales de inicio y de terminacion y un promotor adecuado.
• C) El hecho de que las bacterias tengan 70S en lugar de 80S ribosomas.Incorrecto. La diferencia entre los ribosomas no permite que una bacteria traduzca un gen humano, porque el problema no esta en el tamaño de la maquina de traduccion.
• D) La capacidad bacteriana de replicar con rapidez cualquier fragmento de ADN que se incorpore.Incorrecto. Incorporar un fragmento no basta para que se exprese, y ademas el ADN foraneo suele necesitar una proteccion o una procedencia concreta para sobrevivir.

Respuesta correcta: B) Que cada ciclo duplica la cantidad de ADN presente, de modo que el aumento es exponencial.

• A) Que el ciclo trabaja con una temperatura constante que evita cualquier degradacion.Incorrecto. La PCR cambia de temperatura varias veces en cada ciclo, con una fase de desnaturalizacion cercana a los noventa grados y otras fases a temperaturas menores.
• B) Que cada ciclo duplica la cantidad de ADN presente, de modo que el aumento es exponencial.Correcto. Tras treinta ciclos, una sola molecula inicial puede convertirse en mas de mil millones de copias, y esa eficacia es lo que permite trabajar con cantidades minimas de material.
• C) Que utiliza enzimas que separan las hebras del ADN sin necesidad de calor.Incorrecto. La desnaturalizacion se consigue con calor y no con enzimas, y por eso los ciclos de temperatura son la parte central del procedimiento.
• D) Que aumenta el numero de cromosomas de las bacterias del cultivo.Incorrecto. La PCR trabaja sobre ADN fuera de la celula y en un tubo, de modo que no modifica ningun cromosoma ni ninguna bacteria.

Respuesta correcta: C) La tecnica Southern blot, que separa los fragmentos en un gel y los transfiere a una membrana para hibridar.

• A) La tecnica Northern blot, que analiza el ARN messenger de la muestra.Correcto para el ARN messenger, pero la pregunta se refiere a ADN y por eso corresponde al Southern.
• B) La tecnica Western blot, que detecta proteinas mediante anticuerpos.Incorrecto. El Western blot trabaja con proteinas y el Southern con ADN, de modo que son tecnicas distintas con objetivos distintos.
• C) La tecnica Southern blot, que separa los fragmentos en un gel y los transfiere a una membrana para hibridar.Correcto. El Southern blot separa los fragmentos por tamano, los transfiere a una membrana y permite detectar secuencias concretas mediante una sonda complementaria marcada.
• D) La electroforesis en gel de agarosa sin transferencia a membrana.Incorrecto. La electroforesis separa los fragmentos pero no identifica si contienen una secuencia concreta, porque para eso hace falta la sonda marcada.

Respuesta correcta: D) El numero y la posicion de las bandas, que dependen del tamano de cada fragmento.

• A) El color de las bandas, que indica directamente la secuencia de bases del fragmento.Incorrecto. El gel no determina la secuencia, y solo informa del tamano aproximado de cada fragmento, porque dos fragmentos de igual longitud migran igual aunque sean distintos.
• B) La velocidad a la que se mueven las bandas, que se mide de forma directa durante la carrera.Incorrecto. La observacion se hace al final de la carrera, cuando las bandas se han detenido y pueden medirse con regla sobre la fotografia del gel.
• C) El numero de bandas que aparece, que siempre coincide con el numero de genes del organismo.Incorrecto. El numero de bandas depende de los fragmentos generados por las enzimas usadas y no del numero de genes, que es otra cifra muy distinta.
• D) El numero y la posicion de las bandas, que dependen del tamano de cada fragmento.Correcto. Como la corriente deposita los fragmentos segun su tamano, los pequenos migran mas lejos, de modo que la posicion de cada banda informa del numero de nucleotidos del fragmento.

Respuesta correcta: B) Activar un promotor bacteriano fuerte que provoque la expresion intensa del gen.

• A) Introducir la insulina ya sintetizada en el interior de la bacteria.Incorrecto. La insulina es una proteina y no un gen, de modo que no se introduce el producto final sino la informacion que lo codifica.
• B) Activar un promotor bacteriano fuerte que provoque la expresion intensa del gen.Correcto. Como las bacterias no producen proinsulina funcional de forma espontanea, se usan promotorres bacterianos que fuerzan la transcripcion masiva del gen introducido.
• C) Modificar el ARN mensajero bacteriano despues de la transcripcion.Incorrecto. La modificacion se hace sobre el ADN antes de introducirlo, y una vez que el gen esta presente el proceso ocurre de forma automatica en cada generacion bacteriana.
• D) Seleccionar bacterias que ya producen insulina de forma natural.Incorrecto. Ninguna bacteria produce insulina de forma natural, y esa es precisamente la razon por la que hay que introducir el gen de un organismo eucariota.

Respuesta correcta: C) Porque la matriz de agarosa ofrece menos resistencia a las moleculas pequeñas y estas avanzan con mayor rapidez.

• A) Porque el ADN corto tiene mas enlaces con las bases nitrogenadas y por eso avanza mas.Incorrecto. Los enlaces de las bases estan dentro de la doble hebra, y lo que frena la migracion es el roce con la matriz y no el numero de bases.
• B) Porque el ADN corto tiene menos carga negativa y por eso es arrastrado con mas fuerza.Incorrecto. La carga negativa es proporcional a la longitud, de modo que el fragmento corto tiene menos carga y migra menos, no mas, por el campo electrico.
• C) Porque la matriz de agarosa ofrece menos resistencia a las moleculas pequeñas y estas avanzan con mayor rapidez.Correcto. La velocidad de migracion depende de la relacion entre el tamano de la molecula y la porosidad del gel, de modo que un fragmento corto atraviesa la matriz con menos resistencia y llega mas lejos.
• D) Porque el ADN corto tiene una forma mas globular que el largo.Correcto pero describe una consecuencia parcial, porque la forma del ADN cambia con la concentracion de sal y no es la causa principal.

Respuesta correcta: A) La ingenieria genetica, que recorta los genes con endonucleasas de restriccion y los une con ligasa.

• A) La ingenieria genetica, que recorta los genes con endonucleasas de restriccion y los une con ligasa.Correcto. La ligasa une los fragmentos cuyos extremos son compatibles y permite ensamblar un vector con un gen de interes de forma controlada.
• B) La seleccion natural, que actua durante millones de años y no puede modificar de forma dirigida un gen.Incorrecto. La seleccion natural no permite elegir que caracter se modifica ni en que generacion, de modo que no sirve para construir una bacteria concreta.
• C) La mutacion espontanea, que produce cambios al azar sin dirigirlos hacia un objetivo.Incorrecto. La mutacion espontanea no puede dirigirse hacia un resultado util, de modo que obtener esa bacteria exige diseno experimental y no azar.
• D) La hibridacion molecular, que permite aparear secuencias complementarias entre organismos distintos.Incorrecto. La hibridacion aparea hebras complementarias, pero no une fragmentos de ADN para construir una molecula recombinante.

Respuesta correcta: C) Para estimar el tamano de los fragmentos de la muestra, comparando su migracion con la de los marcadores.

• A) Para aumentar la cantidad de ADN que se aplica en el gel.Incorrecto. El marcador se aplica en un carril aparte y no aumenta la cantidad de muestra, de modo que su funcion es de referencia y no de cantidad.
• B) Para visualizar las bandas de la muestra bajo luz ultravioleta.Incorrecto. La visualizacion depende del colorante que se usa para teñir el ADN, y no del marcador de tamano, que contiene los mismos colorantes pero con otra funcion.
• C) Para estimar el tamano de los fragmentos de la muestra, comparando su migracion con la de los marcadores.Correcto. El marcador contiene fragmentos de longitud conocida y sirve como referencia, de modo que la distancia recorrida permite asignar un tamano aproximado a cada banda de la muestra.
• D) Para separar los fragmentos por su carga electrica y no por su tamano.Incorrecto. La separacion se produce por tamano, y el marcador no cambia el mecanismo, solo proporciona la referencia para medirlo.

Respuesta correcta: A) La presencia de un cromosoma circular con genes organizados en operones.

• A) La presencia de un cromosoma circular con genes organizados en operones.Correcto. Los procariotas suelen tener un unico cromosoma circular, y sus genes funcionalmente relacionados se agrupan en operones que se transcriben a la vez desde un mismo promotor.
• B) La presencia de varios cromosomas lineales con envoltura nuclear que los separa del citoplasma.Incorrecto. Esa descripcion corresponde a los eucariotas, porque la envoltura nuclear y los cromosomas lineales son rasgos eucariotas y no procariotas.
• C) La presencia de varios cromosomas lineales con envoltura, centromeros, telomeros e histonas.Incorrecto. Los cromosomas lineales con histonas, centromeros y telomeros son rasgos de los cromosomas eucariotas, no de los procariotas.
• D) La presencia de intrones en la mayoria de sus genes y de un grado importante de procesamiento del ARN mensajero.Incorrecto. Esos rasgos son tipicos de los eucariotas, y los procariotas suelen tener muy pocos intrones y un ARN mensajero que se traduce casi sin procesar.

Respuesta correcta: B) Porque solo sobreviviran las bacterias que poseen un gen de resistencia, y esas seran las que se multipliquen.

• A) Porque aumenta la velocidad de multiplicacion de las bacterias resistentes.Incorrecto. El antibiotico no acelera nada, y las bacterias que sobreviven lo hacen porque resisten su accion y no porque crezcan mejor.
• B) Porque solo sobreviviran las bacterias que poseen un gen de resistencia, y esas seran las que se multipliquen.Correcto. El antibiotico funciona como filtro: mata a las bacterias susceptibles y permite que las resistentes sobrevivan y crezcan, de modo que se seleccionan las queenya tienen el gen.
• C) Porque obliga a las bacterias a transferir sus genes a las de la especie.Incorrecto. La seleccion no fuerza la transferencia horizontal, y aunque puede favorecer a las que la realizan, no la provoca de forma dirigida.
• D) Porque modifica el ADN de las bacterias y crea nuevas resistencias.Incorrecto. El antibiotico aplica una presion selectiva sobre la variacion ya existente, y no genera por si mismo las mutaciones que luego selecciona.

Respuesta correcta: C) Con un ensayo de PCR o un Southern blot que detecte la secuencia especifica del gen en el ADN de la bacteria.

• A) Observando que la bacteria crecio en un medio con antibiotico, porque eso ya lo confirma.Correcto como primer paso, pero el antibiotico solo indica que hay resistencia y no que el gen de interes este presente y bien orientado.
• B) Mirando el color de la colonia, porque las transformadas tienen un tono distinto.Incorrecto. El color de la colonia depende de los pigmentos que produzca el microorganismo y no de los genes transferidos.
• C) Con un ensayo de PCR o un Southern blot que detecte la secuencia especifica del gen en el ADN de la bacteria.Correcto. Confirmar requiere evidencia directa de la secuencia presente, y tanto la PCR como el Southern blot permiten distinguir una bacteria transformada de una que solo recibio el vector vacio.
• D) Comprobando que la colonia sea mayor que las que no recibieron plasmidio.Correcto pero insuficiente, porque el tamano de la colonia depende de las condiciones del medio y no de la presencia de un gen.

Respuesta correcta: B) Que tiene la misma secuencia de aminoacidos que la humana y por tanto la misma actividad biologica.

• A) Que procede de una celula bacteriana, lo que la hace mas estable en el organismo humano.Correcto como efecto practice, pero no es la propiedad que explica por que es clinicamente util.
• B) Que tiene la misma secuencia de aminoacidos que la humana y por tanto la misma actividad biologica.Correcto. Si la bacteria produce exactamente la misma cadena de aminoacidos, la proteina puede ejercer la misma funcion, y esa equivalencia es la base de los medicamentos biotecnologicos actuales.
• C) Que se fabrica en mucho mayor cantidad y por eso tiene un precio mas bajo.Correcto como consecuencia economica, pero no es lo que hace que la proteina funcione en el cuerpo humano.
• D) Que se encuentra en solucion y por eso se administra sin necesidad de unguento.Correcto como consecuencia practica, pero no explica por que la proteina conserva su funcion.

Respuesta correcta: A) La bacteria Agrobacterium tumefaciens, que transfiere su plasmidio T hacia las celulas vegetales.

• A) La bacteria Agrobacterium tumefaciens, que transfiere su plasmidio T hacia las celulas vegetales.Correcto. Esa bacteria infecta plantas y les transfiere el ADN de su plasmidio Ti, y esa capacidad natural se usa para introducir genes ajenos en el genoma vegetal.
• B) El virus del mosaico del tabacaba, que se usa como portador de genes en plantas.Correcto pero describe un sistema distinto, y en el aula se emplea sobre todo la bacteria Agrobacterium.
• C) La bacteria E. coli, que se utiliza para transformar plantas mediante conjugacion.Incorrecto. La E. coli es la hospedera habitual de clonado en el laboratorio, y no transfiere genes a las celulas vegetales por conjugacion.
• D) El hongo Penicillium, que modifica el ADN de las plantas durante la infeccion.Incorrecto. Los hongos son declarados y parasitos, y no actu an como vectores de genes hacia las celulas vegetales.

Respuesta correcta: D) La transformacion, en la que las bacterias reciben el plasmidio y se vuelven portadoras del gen.

• A) La restriccion, en la que se cortan el vector y el gen de interes con enzimas de restriccion.Incorrecto. La restriccion es un paso previo de preparacion de los fragmentos, y no la incorporacion del material a la celula.
• B) La ligasa, en la que se unen los fragmentos de ADN para formar el plasmidio.Incorrecto. La ligasa forma el recombinante que luego se introduce, de modo que es un paso anterior a la transformacion.
• C) La seleccion, en la que se cultivan las bacterias en un medio con antibiotico.Incorrecto. La seleccion distingue las bacterias que recibieron el plasmidio de las que no, y ocurre despues de la transformacion.
• D) La transformacion, en la que las bacterias reciben el plasmidio y se vuelven portadoras del gen.Correcto. La transformacion es el paso en que la bacteria incorpora el ADN foraneo, y de ella depende que las fases siguientes tengan algo que propagar.

Respuesta correcta: B) Que su secuencia es identica a la humana, de modo que provoca menos reacciones alergicas y es mejor tolerada.

• A) Que se fabrica en mayor cantidad y por eso se consigue a menor precio en el mercado.Correcto como consecuencia comercial real, pero no es la ventaja biomedica que distingue a la insulina humana de la animal.
• B) Que su secuencia es identica a la humana, de modo que provoca menos reacciones alergicas y es mejor tolerada.Correcto. La insulina porcina tiene una diferencia de un aminoacido respecto de la humana, mientras que la bacteriana reproduce la secuencia exacta y por eso ofrece menos problemas inmunologicos.
• C) Que se administra por via oral porque se disuelve en agua.Incorrecto. La insulina recombinante se administra por inyeccion, igual que la de origen animal, porque es una proteina que se digiere en el aparato digestivo.
• D) Que no necesita ninguna modificacion posterior a la fermentacion bacteriana.Incorrecto. La insulina recombinante si requiere un proceso de purificacion y maduracion, y esa etapa es imprescindible para obtener una molecula activa.

Respuesta correcta: C) El equilibrio entre el beneficio que aporta y los riesgos para la salud y para la diversidad biologica.

• A) El equilibrio entre la rapididad de las tecnicas y la lentitud con que se acumulan sus efectos en los seres vivos.Correcto como parte del analisis, pero por si solo no constituye la dimension etica de la cuestion.
• B) La decision de si las plantas con genes ajenos son mas utiles que las que no los tienen.Correcto pero se limita a un caso, y la cuestion etica abarca los organismos modificados en general.
• C) El equilibrio entre el beneficio que aporta y los riesgos para la salud y para la diversidad biologica.Correcto. La biotecnologia ofrece ventajas claras en salud y en la produccion, y a la vez plantea preguntas legitimas sobre seguridad, acceso y efectos a largo plazo sobre los ecosistemas.
• D) La cuestion de si los microorganismos usados en laboratorio son mas peligrosos en la naturaleza.Correcto como riesgo concreto, pero no agota el conjunto de cuestiones que plantea la disciplina.